第四节病毒的血清学检测
许多血清学技术可用于病毒及其相应抗体的检测
如:
中和试验(最常用,新分离病毒,判断血清型)
免疫染色技术
免疫沉淀技术
免疫转印技术
酶联免疫吸附试验(elisa)等
病毒中和试验:
针对病毒的一些蛋白质抗原或抗原表位的抗体与病毒结合后可以中和病毒的感染性。
中和试验具有很强的特异性,是检测病毒和新分离病毒毒株的鉴定最经典的方法,也可用于检测病毒感染动物血清中的抗体。
血凝抑制试验(特异性):
具有血凝活性病毒的抗体可阻断病毒与红细胞的结合。
利用血凝抑制试验可检测和鉴定具有血凝特性的病毒。
将特异性抗体与病毒作用,然后观察血凝抑制现象。
该法敏感、简单、费用低、操作简便也用于检测动物血清中血凝抑制抗体。
病毒蛋白的检测:
病毒抗体可用于检测感染细胞或组织中的病毒蛋白。
采用免疫染色技术如免疫荧光抗体技术、免疫酶染色技术,有直接免疫染色和间接免疫染色两种方法。
酶联免疫吸附试验(elisa)(临床实验应用最广泛)
酶联免疫吸附试验可用于样本中病毒检测和动物血清中病毒特异性抗体的检测。
检测病毒抗原可采用夹心法和双夹心法。
检测抗体可采用间接法。
病毒核酸的检测
病毒核酸检测是指利用一些分子生物学技术检测病毒核酸而确证样本中病毒的存在
基因组电泳分析
核酸杂交
聚合酶链式反应(pcr)
酶切图谱分析
dna芯片技术等
病毒的鉴定依据:
病毒的初步鉴定依据:
()动物感染范围及潜伏期
()对鸡胚的敏感性、细胞形态变化类型
()病毒干扰现象、血凝性质、红细胞吸附。
()理化性质:
病毒核酸类型测定
病毒大小形态
病毒对乙醚敏感试验
病毒耐酸试验
病毒的最后鉴定依据:
主要是血清学方法和分子生物学方法
血清学方法: